與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測(cè)很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,***降低了背景信號(hào)和***物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,有需要可以聯(lián)系我司哦!寧夏分析數(shù)字PCR供應(yīng)商
研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學(xué)研究中重要的一個(gè)研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術(shù)來進(jìn)行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測(cè)序統(tǒng)計(jì)法、抗體檢測(cè)法、定量PCR檢測(cè)法等。這些方法皆因方法學(xué)的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對(duì)樣品的微滴化處理及目標(biāo)因子的***拷貝數(shù)定量,為甲基化程度的精確定量檢測(cè)提供了一種全新 的技術(shù)。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標(biāo)本中的DNA,有正常脫落體細(xì)胞和病變脫落細(xì)胞兩種來源,前者的量遠(yuǎn)大于后者。通過微液滴處理能在每個(gè)微液滴中有效減少正常體細(xì)胞DNA的干擾,實(shí)現(xiàn)**標(biāo)記物的有效檢測(cè),如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測(cè)、乳腺*/胃*的HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)等,應(yīng)用于**精細(xì)醫(yī)學(xué)的伴隨診斷。河北安全數(shù)字PCR定制數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需要可以聯(lián)系我司哦!
研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對(duì)于低豐度目標(biāo)序列的檢測(cè),定量PCR、雜交、毛細(xì)管測(cè)序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測(cè)靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測(cè)中Ct值大于33的情況下,其重復(fù)性就不是很高),而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來,從而提高了檢測(cè)的靈敏度及重復(fù)性。此外,由于樣品微滴化處理的同時(shí),也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對(duì)于***劑的耐受程度,因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對(duì)**核酸標(biāo)記物的檢測(cè)。一般而言,毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測(cè)靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測(cè)下限為0.001%。
MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點(diǎn):1、JUE對(duì)定量,結(jié)果判讀不需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線;2、突破局限,檢測(cè)靈敏度可低至萬分之一;3、專利設(shè)計(jì)的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時(shí)處理1-8個(gè)樣本;4、一鍵式自動(dòng)操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個(gè)樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測(cè)靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對(duì)檢測(cè)特異性的影響,且方向性好;6、檢測(cè)器為2個(gè)光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計(jì)數(shù)器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達(dá)到10^9;7、 知識(shí)產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計(jì)算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動(dòng)或手動(dòng)完成,每個(gè)樣本可單獨(dú)設(shè)定閾值線;輸出數(shù)據(jù)圖標(biāo)、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動(dòng)識(shí)別復(fù)雜微滴分簇四簇;軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能,支持陽性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計(jì)及這些指標(biāo)的任意組合;單個(gè)樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測(cè)系統(tǒng),配以獨(dú)特的軟件系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)20重的PCR分析;8、單次檢測(cè)通量96個(gè)樣本,操作靈活;浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR 。
產(chǎn)品特點(diǎn)無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)核酸的***定量。全封閉防污染設(shè)計(jì),一鍵式自動(dòng)化操作。采用主流可靠的解決方案,系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測(cè)儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術(shù),在微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng),2mins生成高達(dá)10萬個(gè)皮升級(jí)的微滴,高效高產(chǎn),支持多重?cái)?shù)字PCR的開發(fā)。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設(shè)計(jì),三維微納防污染結(jié)構(gòu),一張芯片可同時(shí)處理8個(gè)樣本。微滴檢測(cè)使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測(cè)線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),基因突變檢測(cè)靈敏度高達(dá)0.01%。檢測(cè)通量高,可一次檢測(cè)高達(dá)96個(gè)樣本,支持靈活設(shè)定。全中文分析軟件,人性化界面設(shè)置,多種分析工具供用戶選擇。本系統(tǒng)為開放式平臺(tái),可使用第三方PCR反應(yīng)液,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有需求可以來電咨詢!遼寧應(yīng)用廣數(shù)字PCR售后
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dPCR的基本原理目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒有模板的反應(yīng)器就沒有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度??梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細(xì)管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設(shè)分子種群遵循泊松分布來估計(jì)不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計(jì)算,從而解決了多個(gè)目標(biāo)分子存在于單個(gè)液滴中的可能性。寧夏分析數(shù)字PCR供應(yīng)商